2025年1月26日高中生物作业

1. 下列关于泡菜制作的叙述中，正确的是（）

A．主要菌种是真菌	B．制作过程不必严格执行无菌操作
C．所用装置不需要密封	D．所用菌种需要人工接种

2. 钙果又名欧李，果实中含有多种对人体有益的矿物质元素，利用其加工成果汁、果酒、果醋等产品。下列有关叙述正确的是（）

A．利用醋酸菌进行钙果果醋发酵时，温度应控制在18~30℃

B．在钙果果酒发酵期间，为保持无氧环境，不能拧松发酵瓶盖

C．传统制作钙果果酒、果醋时，应将原料钙果果汁进行高压蒸汽灭菌

D．钙果果酒的颜色是钙果果皮和果肉中的色素进入发酵液形成的

3. 从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜逐渐变酸，乳酸菌与杂菌数目也发生变化，下列有关分析不正确的是（）

A．泡菜制作初期就有乳酸菌的存在

B．密闭的发酵环境使乳酸菌在种间竞争中占据一定优势

C．在发酵过程中，乳酸含量逐渐增多，可以抑制其他微生物的生长

D．发酵过程中，杂菌数目的减少使乳酸菌与杂菌的种间竞争减弱，因此乳酸菌数目一直增多

4. 天津独流老醋历史悠久、独具风味，其生产工艺流程如下图。

（1）在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度，这是因为酶_____________________。
（2）在酒精发酵阶段，需添加酵母菌。在操作过程中,发酵罐先通气，后密闭。通气能提高____________的数量，有利于密闭时获得更多的酒精产物。
（3）在醋酸发酵阶段，独流老醋采用独特的分层固体发酵法，发酵30天。工艺如下。

① 发酵过程中,定期取样测定醋酸杆菌密度变化,趋势如右图。据图分析，与颠倒前相比，B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是_____________，由此推断，影响醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是____________________。

②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中，发酵缸中____________层醋醅有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸。
③成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少，主要原因是发酵后期营养物质消耗等环境因素的变化，加剧了不同种类乳酸菌的____________，淘汰了部分乳酸菌种类。
5. 与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量明显提高。下列相关表述正确的是（）

A．发酵工程与传统发酵技术最大的区别就是前者可以利用微生物来进行发酵

B．发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身

C．在发酵工程的发酵环节中，发酵条件变化会影响微生物的生长繁殖，但不会影响微生物的代谢途径

D．通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白

6. 由于发酵工程原料来源丰富、价格低廉等，在医药工业、农牧业等许多领域得到了广泛的应用。下列有关发酵工程及其应用的叙述，错误的是（）

A．从培养的微生物细胞中分离出的单细胞蛋白可制成微生物饲料

B．将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌，再通过发酵可生产乙型肝炎疫苗

C．通过发酵工程生产的苏云金杆菌可制成微生物农药，用来防治多种农林虫害

D．培养基或发酵设备灭菌不彻底，会造成发酵产品的产量和质量下降

7. 下列关于发酵工程的叙述，错误的是（）

A．培养基和发酵设备都必须经过严格灭菌，发酵过程中适时补充灭菌的培养液和空气

B．发酵时，发酵条件变化会影响微生物生长，不影响微生物的代谢途径

C．发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节

D．若发酵产品是微生物菌体本身，可通过过滤、沉淀等方法分离和干燥，得到产品

8. 葡萄酒的制作离不开酵母菌。下列说法错误的是（）

A．无氧条件下酵母菌能存活但不能大量繁殖

B．自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是野生型酵母菌

C．葡萄酒的颜色是葡萄皮中的色素进入发酵液形成的

D．制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量增加

9. 食品工业是微生物最早开发和应用的领域，一直以来，与发酵有关的食品工业的产量和产值都居于发酵工业的首位。下列相关叙述错误的是（　　）

A．利用乳酸菌在青贮饲料中乳酸发酵产生有机酸而实现饲料保鲜

B．利用酵母菌等菌种的发酵工程生产的单细胞蛋白，可作为食品添加剂

C．以大豆为主要原料，利用黑曲霉水解其中的蛋白质，经淋洗、调制成酱油

D．发酵是指在无氧的条件下，利用微生物代谢将原料转化为人类所需要的产物的过程

10. 啤酒的工业化生产中，大麦经发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒等工序后，最终过滤、调节、分装。下列说法正确的是（）

A．用赤霉素处理大麦，可使大麦种子无须发芽就能产生α-淀粉酶

B．焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚并进行灭菌

C．糖浆经蒸煮、冷却后需接种酵母菌进行发酵

D．通过转基因技术可减少啤酒酵母双乙酰的生成，缩短啤酒的发酵周期

11. 在制作发酵食品的学生实践中，控制发酵条件至关重要。下列相关叙述错误的有（）

A．泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气

B．制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料

C．葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后，可直接通入无菌空气制作葡萄醋

D．果酒与果醋发酵时温度宜控制在18～30 ℃，泡菜发酵时温度宜控制在30～35 ℃

12. 利用菠萝蜜制作果醋的大致流程为：先在灭菌的果肉匀浆中接种酵母菌，发酵6天后，再接入活化的醋酸杆菌，发酵5天。下列有关叙述错误的是（　　）

A．乙醇既是醋酸发酵的底物，又可以抑制杂菌繁殖

B．酵母菌和醋酸杆菌均以有丝分裂的方式进行增殖

C．酵母菌和醋酸杆菌发酵过程中控制通气的情况不同

D．接入醋酸杆菌后，应适当升高发酵温度

13. 酱豆的制作要经过两次发酵。第一阶段以大豆为主要原料，利用毛霉和曲霉等的作用分解大豆蛋白。第二阶段以蔬菜与发酵过的大豆为主，进行乳酸发酵。下列叙述错误的是（）

A．毛霉产生的蛋白酶能催化分解大豆蛋白，产生易消化的小分子肽和氨基酸

B．第一阶段在无氧条件下发酵时适度保湿，有利于霉菌的菌丝生长

C．加入一定量的食盐、生姜、蒜瓣和其他香辛料能防腐杀菌、调制风味

D．第二阶段会产生乳酸和亚硝酸盐，乳酸积累会导致发酵体系的pH降低

14. 废水、废料经加工可变废为宝。某工厂利用果糖生产废水和沼气池废料生产蛋白质的技术路线如图所示。下列叙述正确的是（　　）

A．该生产过程中，一定有气体生成

B．微生物生长所需碳源主要来源于沼气池废料

C．该生产工艺利用微生物厌氧发酵技术生产蛋白质

D．沼气池废料和果糖生产废水在加入反应器之前需要灭菌处理

15. 关于黄酒酿造方法，古遗六法中描述道：黍米必齐、曲蘖必时、水泉必香、陶器必良、湛炽必洁、火剂必得（注：曲蘖主要指酒曲，湛炽是指浸泡和蒸煮）。下列叙述错误的是（）

A．黄酒中的酒精是酵母菌利用“黍米”经无氧呼吸产生的代谢产物

B．利用酵母菌发酵的过程中，水和酒精是同时产生的

C．“陶器必良”和“火剂必得”是为了控制发酵过程的环境条件

D．黄酒酿造过程中发酵液出现的气体不都是在酵母菌细胞质基质中产生的

16. 《本草纲目》中记载了酿制烧酒的过程，“以糯米或粳米等蒸熟，酿瓮中七日……入甑蒸令汽上，用器承取滴露”“凡酸坏之酒，皆可蒸烧”。下列相关叙述错误的是（）

A．糯米或粳米中所含物质可为微生物提供碳源和氮源

B．利用酵母菌发酵的“七日”中一开始就有大量酒精产生

C．“入甑蒸令汽上”充分利用了酒精易挥发的特点

D．“酸坏”是醋酸菌将乙醇变为乙酸，温度应为30~35℃

17. 有关泡菜中亚硝酸盐含量的研究表明，亚硝酸盐的含量高低和亚硝酸盐含量峰值时间的早晚与食盐的浓度有关（见下图），下列有关叙述不正确的是（）

A．所用的食盐水经煮沸后可除去水中的氧气并杀灭杂菌

B．制作泡菜“咸而不酸”的原因可能与食盐浓度过高，温度过低导致不能正常发酵有关

C．食盐的浓度越高，亚硝酸盐生成快，亚硝酸盐含量峰值出现得早

D．取食泡菜时，时间别太长，防止空气进入

18. 红薯酿制的黄酒，酒精度约为9%，制作过程如下图所示，下列叙述错误的是（）

A．浸出液过滤后应保存于密闭容器中，留1/3的空间

B．麦芽中含有淀粉酶可将红薯中的淀粉水解，利于酵母菌获得更多发酵底物

C．酵母菌繁殖的最适温度是30℃，温度上升至30℃有利于酵母菌大量繁殖

D．温度上升至30℃，此后每半天搅拌一次，搅拌的目的使酵母菌与营养物质充分混合

19. 图甲是果醋发酵装置。发酵初期不通气，溶液中有气泡产生；中期可以闻到酒香；后期接种醋酸菌，适当升高温度并通气，酒香逐渐变成醋香。图乙中能表示整个发酵过程培养液pH变化的曲线是（）

A．①

B．②

C．③

D．④

20. 很多生活实例中蕴含着微生物发酵的原理。下列相关叙述错误的是（）

A．自制葡萄酒在发酵过程中，葡萄汁应装满发酵瓶并加盖以确保无氧

B．夏天开瓶后的红酒容易变酸，是由于空气中的醋酸菌将乙醇变成乙醛而后变为乙酸

C．用巴氏消毒法能对牛奶消毒杀死其中的绝大多数微生物，且不破坏牛奶的营养成分

D．用白萝卜制作泡菜时为缩短腌制时间，可向新坛中添加老坛内已经腌制过的泡菜汁

21. 下列关于利用传统发酵技术生产腐乳的相关叙述中，正确的是（　　）

A．发酵生产腐乳时所用的微生物有酵母、曲霉和毛霉等

B．起主要作用的微生物为原核生物，其有氧呼吸的场所为细胞质基质

C．豆腐中的蛋白质在发酵过程中会被分解成肽和氨基酸

D．大规模生产中加入适量的抗生素可以一定程度上防止杂菌的感染

22. 下列关于发酵工程应用的说法，正确的是（）

A．食品添加剂由于可以增加食品营养，改善食品的色、香、味，还可以延长保存期，使用时应尽量多添加

B．利用放线菌产生的井冈霉素防止水稻枯纹病是化学防治的有效手段

C．在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，使饲料保鲜，同时提高动物免疫力

D．从微生物细胞中提取的单细胞蛋白可制成动物饲料的添加剂

23. 啤酒是以大麦芽、啤酒花、水为主要原料，经酵母发酵作用酿制而成的饱含二氧化碳的低酒精度酒。啤酒中的低分子糖和氨基酸很容易被吸收利用，在体内产生大量的热量，被称为“液体面包”。如图是啤酒生产工艺流程简图。下列说法错误的是（）

A．焙烤、蒸煮处理方法在杀死活细胞的同时使所含的酶失去活性

B．发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期应延长排气时间间隔

C．主发酵阶段酵母菌大量繁殖，后发酵阶段进行糖的分解和代谢物的生成

D．用脱落酸溶液浸泡大麦种子可以有效促进α-淀粉酶合成，增加麦芽汁中可发酵糖的含量

24. 我国酿制果酒和果醋的历史源远流长，某同学欲通过如下发酵装置制作葡萄酒和葡萄醋。请回答下列问题：

(1)利用酵母菌制作果酒时，温度一般控制在_______℃。发酵初期一般先通气后紧闭软管夹，通气的目的是______。通气后紧闭软管夹时酵母菌呼吸作用的反应方程式为______。
(2)若要检测果汁发酵后是否有酒精产生，可以从出料口吸取2mL发酵液加入试管，再滴加0.5mL____溶液，观察其是否呈现_______色。
(3)某同学在制作好的葡萄酒的基础上发酵制作葡萄醋，用化学反应式表示其原理______；发酵条件需要做出的具体调整是___。
(4)图中排气构件由回旋式单向阀通过硅胶塞连接于排气口而成，使用前先在单向阀内装入约1/3体积冷却的开水，这样处理的主要好处有_____（至少答出两点）。
25. 生活中常用的调味料－味精的主要成分为谷氨酸钠。从1957年用微生物发酵法生产谷氨酸开始，微生物发酵法一直是生产味精的主要方法。用15%左右的葡萄糖溶液、适量的无机盐和液氨配成发酵培养基，接种谷氨酸棒状杆菌，给予适宜的条件，进行发酵产谷氨酸，再制成钠盐即为味精。回答下列问题：
（1）葡萄糖可为谷氨酸棒状杆菌的生长提供____________，培养基中的葡萄糖溶液的浓度___________（填“能”或“不能”）由15%左右提升到25%，原因是____________。发酵用的培养基通常采用____________法进行灭菌，生产谷氨酸的过程中，采用液体培养基的原因是____________。
（2）在发酵过程中，当pH呈酸性时，谷氨酸棒状杆菌就会生成乙酰谷氨酰胺；当溶氧不足时，生成的代谢产物就会是乳酸或琥珀酸。根据以上信息，在生产谷氨酸的过程中，应采取的措施是____________。
（3）谷氨酸脱氢酶直接催化谷氨酸的产生。研究发现，当谷氨酸棒状杆菌内谷氨酸的浓度升高到一定程度时，会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，这种调节方式称为____________调节，这种调节对微生物的意义是____________。
26. 不同的微生物对营养物质的需求各不相同。下列有关一种以CO₂为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是（）

A．氮源物质为该微生物提供必要的氮元素

B．碳源物质也是该微生物的能源物质

C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质

D．为制成固体培养基往往需要加入琼脂作为凝固剂

27. 微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作，错误的是（）
①干热灭菌可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢
②无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒
③加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌
④涂布平板时所用的涂布器需酒精浸泡后灼烧灭菌
⑤培养基要进行高压蒸汽灭菌
⑥家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌

A．①②⑤

B．②④

C．①③⑥

D．④⑥

28. 如图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法不正确的是（）

A．步骤

倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置

B．①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行

C．操作③到④的过程中，每次接种前后都需要对接种环进行灼烧处理

D．用接种环在平板上划线时注意不能将培养基划破

29. 回答下列与细菌培养相关的问题。
（1）在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是_____________（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO₃”）。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，其原因是________。硝化细菌在没有碳源的培养基上______（填“能够”或“不能”）生长，原因是____________。
（2）用平板培养细菌时一般需要将平板____________（填“倒置”或“正置”）。
（3）单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是____________。
（4）有些使用后的培养基在丢弃前需要经过____________处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。
30. 下列有关土壤中微生物的分离与计数的说法，错误的是（）

A．土壤中各类微生物的数量不同，为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离

B．测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同

C．可根据菌落的特征，区分不同的微生物

D．牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显小于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落

31. 某一种细菌菌株需要从环境中摄取现成的亮氨酸才能够生长，此菌株对链霉素感。实验者用诱变剂处理此菌株，想筛选出表中列出的细菌菌株类型。根据实验目的，选用的培养基类型是（）
注: L- -亮氨酸s一链霉素“+”表示加入“-”表示不加入

选项	筛选出不需要亮氨酸的菌株应使用的培养基	筛选出抗链霉素的菌株应使用的培养基	筛选出不需要亮氨酸、抗链霉素的菌株应使用的培养基
A	L+， S+	L-， S-	L+， S-
B	L-， S+	L+， S+	L-， S-
C	L-， S-	L+， S+	L-， S+
D	L+， S-	L-， S-	L+， S+

A．A

B．B

C．C

D．D

32. 某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。

回答下列问题：
（1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用_______________的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_______________。甲、乙培养基均属于______________培养基。
（2）实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×10⁷个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释________________倍。
（3）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是________________（答出1点即可）。
（4）若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤________________。
（5）上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即________________。
33. 解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲，乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色，下列说法错误的是（）

A．甲菌属于解脂菌

B．实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源

C．可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比

D．该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力

34. 人体皮肤表面存在着多种微生物，某同学拟从中分离出葡萄球菌。下述操作不正确的是（　　）

A．对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌

B．使用无菌棉拭子从皮肤表面取样

C．用取样后的棉拭子在固体培养基上涂布

D．观察菌落的形态和颜色等进行初步判断

35. 为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是（）

A．倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整

B．图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑取单菌落

C．该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的

D．菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色

36. 某同学从被石油污染的土壤中分离得到A和B两株可以降解石油的细菌，在此基础上采用平板培养法比较二者降解石油的能力，并分析两个菌株的其他生理功能。
实验所用的培养基成分如下。
培养基Ⅰ：K₂HPO₄，MgSO₄，NH₄NO₃，石油。
培养基Ⅱ：K₂HPO₄，MgSO₄，石油。
操作步骤：
①将A、B菌株分别接种在两瓶液体培养基Ⅰ中培养，得到A、B菌液；
②液体培养基Ⅰ、Ⅱ中添加琼脂，分别制成平板Ⅰ、Ⅱ，并按图中所示在平板上打甲、乙两孔。
回答下列问题。

菌株	透明圈大小
菌株	平板Ⅰ	平板Ⅱ
A	+++	++
B	++	-

(1)实验所用培养基中作为碳源的成分是____________。培养基中NH₄NO₃的作用是为菌株的生长提供氮源，氮源在菌体内可以参与合成____________（答出2种即可）等生物大分子。
(2)步骤①中，在资源和空间不受限制的阶段，若最初接种N₀个A细菌，繁殖n代后细菌的数量是____________。
(3)为了比较A、B降解石油的能力，某同学利用步骤②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ进行实验，结果如表所示（“+”表示有透明圈，“+”越多表示透明圈越大，“-”表示无透明圈），推测该同学的实验思路是__________。
(4)现有一贫氮且被石油污染的土壤，根据上表所示实验结果，治理石油污染应选用的菌株是____________，理由是___________。
37. 微生物的纯培养既需要适宜的培养基，又要防止杂菌污染，下列相关叙述正确的是（　　）

A．培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利

B．水是培养基的营养构成成分

C．微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物

D．微生物的纯培养包括配制培养基、接种、分离和培养等步骤

38. 下列有关传统发酵技术的操作，不正确的是（）

A．制作果酒时，先将葡萄冲洗后，再除去枝梗

B．制作泡菜时，泡菜盐水入坛前应煮沸冷却，坛盖边沿的水槽中注满水

C．制作腐乳时，加盐腌制可使豆腐块变硬且能抑制杂菌生长

D．制作酸奶时应保证有氧环境以提高酸奶的酸度

39. 微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。下列关于酵母菌的纯培养的叙述错误的是（　　）

A．采用平板划线法和稀释涂布平板法均可分离酵母菌

B．可用湿热灭菌法对培养酵母菌的马铃薯琼脂培养基进行灭菌

C．通过接种环连续蘸取菌液在固体培养基表面划线的操作，可将菌种逐步稀释

D．完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板（和一个未接种的平板）倒置培养

40. 下列有关微生物培养的叙述，正确的是（）

A．涂布接种时，需将涂布器沾酒精后在酒精灯外焰上引燃，冷却后再使用

B．纯化培养时，培养皿应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养

C．分离计数时，可用稀释涂布平板法对需计数的微生物进行分离

D．观察菌落时，应将培养皿盖拿掉以利于看清菌落的形态特征

41. MIC是指药敏试验中某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度。某研究小组将含有相同浓度抗生素Ⅰ-IV的四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的琼脂平板上进行药敏试验，以了解病原微生物对四种抗生素的敏感程度，下图所示为实验结果。相关叙述正确的是（　　）

A．培养基中的琼脂可以为测试菌提供碳源

B．实验中可以通过抑菌圈的大小来判定抗生素的抑菌效果

C．抑菌圈中离纸片越近的菌落对抗生素IV的抗性越强

D．抑菌圈中出现菌落的原因可能是抗生素使病原菌产生耐药性基因突变

42. 下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法正确的是（）

A．步骤①后需将培养基灭菌并调节 pH

B．步骤①②③操作时需要在酒精灯火焰附近进行

C．步骤③到④的过程中，接种环共灼烧处理了 5 次

D．图中步骤①结束后需倒置平板，④结束后不需要

43. 某研究小组从牛的瘤胃中采集样本，进行分解尿素的微生物的分离与计数。实验基本步骤如下。将1 mL瘤胃样液稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板的菌落数分别为49、47和45。下列叙述不正确的是（）

→→ →→

A．牛的瘤胃中采集样本之后，若要扩大培养，扩大培养的培养基中不能加琼脂

B．配制的培养基从用途看属于选择培养基

C．对尿素溶液进行灭菌不能用高压蒸汽灭菌

D．每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为4.7X10⁷

44. 下图为分离以尿素为氮源的微生物的实验结果，下列叙述正确的是（）

A．图中采用平板划线法接种

B．图中①和②表示尿素培养基长出的菌落

C．图中③④培养基中菌落生长代谢时，会释放CO₂

D．实验结果表明，自然界中能合成脲酶的微生物比例较高

45. 羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA菌种的流程图如下。下列叙述正确的是（）
①取湖水→②接种在培养基上→③培养→④挑取单菌落，分别扩大培养→⑤检测菌体的数目和PHA的产量→⑥获得目标菌株

A．步骤④中扩大培养采取的接种方法为平板划线法

B．步骤②要用稀释涂布平板法接种到含PHA的选择培养基上

C．步骤⑤所获数据，可用于计算单一菌体产生PHA的效率

D．步骤③的培养基为固体培养基，长出的单菌落不一定能合成PHA

46. 产脂肪酶细菌可用于含油废水的处理。科研人员采用射线照射从土壤中分离的菌株，反复筛选后获得产脂肪酶能力较高的菌株，具体流程如图。下列相关叙述错误的是（）

A．步骤①取土壤样品灭菌后溶于无菌水中制成菌悬液

B．步骤②的固体平板是以脂肪作为唯一碳源的培养基

C．步骤②射线照射可引起细菌基因突变或染色体变异

D．步骤③透明圈越大的菌落，其脂肪酶活性一定越高

47. 野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型菌株由于发生基因突变而无法合成某种氨基酸只能在完全培养基上生长，下图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，数字代表培养基，A、B、C表示操作步骤。下列有关说法不正确的是（）

A．①②为完全培养基，③④为基本培养基

B．A操作的目的是提高突变菌株的浓度

C．B操作可用涂布器蘸取菌液均匀的涂布在②表面

D．经C过程影印及培养后，可从④培养基中挑取E菌落进行纯化培养

48. 某生物兴趣小组完成了“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”的实验，具体操作流程如图所示。下列相关叙述正确的是（）

A．纯化培养阶段使用选择培养基，应以尿素为唯一氮源

B．振荡的目的是为了增加尿素分解菌的浓度

C．中间试管涂布的3个平板的菌落平均数小于160

D．由图中数据可知10克土样中的菌株数约为1．6×10⁸个

49. 化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业、用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此，某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见表。

碳源	细胞干重（g/L）	S产量（g/L）
葡萄糖	3.12	0.15
淀粉	0.01	0.00
制糖废液	2.30	0.18

回答下列问题。
(1)通常在实验室培养微生物时，需要对所需的玻璃器皿进行灭菌，灭菌的方法有______（答出2点即可）。
(2)由实验结果可知，菌株C生长的最适碳源是______；用菌株C生产S的最适碳源是______。菌株C的生长除需要碳源外，还需要______（答出2点即可）等营养物质。
(3)由实验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，其原因是______。
(4)若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产S的最适碳源浓度，某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路：______。
(5)利用制糖废液生产S可以实现废物利用，其意义是______（答出1点即可）。
50. 牛奶是适合微生物生长的良好培养基。牛奶在饮用前都要用巴氏消毒法消毒，以杀死有害微生物。某小组为检测自制酸奶是否被杂菌污染，进行了如图所示操作。请据图回答下列问题：

(1)图1所示方法为_______________，若取最终的牛奶稀释液0.1mL在培养基上进行涂布，应选择的工具是图2中的_______________。
(2)理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为65、63、64，则可以推测每毫升酸奶中所含细菌数为_______________。运用这种方法统计的结果往往较实际值__________（填“大”或“小”），其原因是_____________________。
(3)接种操作完成后，需将平板倒置放入培养箱中培养，倒置的目的是不仅能防止水分过快挥发，而且可以______________________________。如果培养基上出现形状、大小、颜色不同的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。
(4)要进一步分离纯化菌种，应采用图3中______（填字母）所示的划线分离操作，其正确操作过程中，划线工具至少要灼烧_______次。

(5)某同学在学习了传统发酵技术的应用后，进行了酸奶制作的实践，制作步骤如下：
①将瓶子（连同盖子）、勺子放在电饭锅中加热煮沸10分钟。
②瓶子稍冷却后，向瓶子中倒入牛奶，再放入电饭锅中沸水浴加热10分钟。
③待牛奶冷却至40℃左右（不烫手）时倒入牛奶量1/5的酸奶作“引子”，用勺子搅拌均匀，拧紧瓶盖。
④将电饭锅温度调至40℃，继续保温7～8h。
酸奶中（作“引子”）的有益菌主要是_______________，待牛奶冷却后才能倒入酸奶的原因是_______________，将瓶盖拧紧的目的是________________________。
(6)适量饮用酸奶可以抑制有害菌在肠道中生长繁殖，从而______________________________，并且在代谢过程中不产生气体，还有利于改善腹胀。

Keys

1. B.
【分析】
泡菜发酵的实验原理：
（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。
（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。
（3）测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。
【详解】
A、制作泡菜主要菌种是乳酸菌，不是真菌，A错误；
B、乳酸菌耐酸性环境，其产生的乳酸可以抑制其他微生物的生长，泡菜制作过程不必严格执行无菌操作，B正确；
C、乳酸菌是厌氧细菌，泡菜制作的过程需要密封，C错误；
D、泡菜制作过程所用的菌种来源于蔬菜表面，D错误。
故选B。
2. D.
【分析】
1.果酒制作菌种是酵母菌，代谢类型是异养兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18～25℃、前期需氧，后期不需氧。
2.果醋制作菌种是醋酸菌，属于原核细胞，适宜温度为30～35℃，需要持续通入氧气。
【详解】
A、醋酸菌的最适生长温度为30～35℃，故利用醋酸菌进行钙果果醋发酵时，温度应控制在适宜其生长的温度范围，A错误；
B、在钙果果酒发酵期间，需要保持无氧环境，因为发酵过程中酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，由于有气体产生，需要适时拧松瓶盖放气，拧松瓶盖放气的主要目的是避免杂菌污染，B错误；
C、传统制作钙果果酒、果醋时，利用的是果汁中带有的野生型酵母菌，因此不需要将原料钙果果汁进行高压蒸汽灭菌，C错误；
D、钙果果酒的颜色的形成是由于钙果果皮和果肉中的色素进入发酵液形成的，D正确。
故选D。
3. D.
【分析】
泡菜在腌制过程中，乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化：①发酵初期：以不抗酸的大肠杆菌和酵母菌的活动为主，同时还有一部分硝酸盐还原菌活动。该时期利用了氧气，产生了厌氧环境，乳酸菌才开始活动。此时乳酸菌和乳酸的量都比较少，而由于硝酸盐还原菌的活动，亚硝酸盐含量有所增加。②发酵中期：由于乳酸菌产生了大量乳酸，其他细菌活动受到抑制，只有乳酸菌活动增强。此时期乳酸菌数量达到最高峰，乳酸的量继续积累。由于硝酸盐还原菌受抑制，同时形成的亚硝酸盐又被分解，因而亚硝酸盐含量下降。所以在整个发酵过程中，亚硝酸盐的含量表现为先增加后下降的趋势。③发酵后期：由于乳酸的积累，酸度继续增长，乳酸菌活动也受到抑制。乳酸菌数量下降，而硝酸盐还原菌完全被抑制。
【详解】
A、泡菜制作初期多种微生物并存，也存在乳酸菌，才可制作到泡菜，A正确；
B、乳酸菌是厌氧细菌，密闭发酵产生了厌氧环境，有些菌是好氧的，于是乳酸菌在种间竞争中占据一定优势，B正确；
C、发酵过程中，乳酸含量不断增多，酸度不断增长，氧气含量不断减少，直至全部消耗，可以抑制其他微生物的生长，C正确；
D、发酵后期，由于乳酸的积累，酸度继续增长，乳酸菌活动也受到抑制，因此乳酸菌数目不会一直增多，D错误。
故选D。
4.      在最适温度条件下催化能力最强     酵母菌     先快速增长后趋于稳定     氧气、营养物质、pH     颠倒前的B层和颠倒后的A（或不翻动，或下）     种间竞争（或竞争）.
【分析】
醋酸发酵是利用醋酸菌,醋酸菌是需氧型的,乳酸发酵是利用乳酸菌的无氧呼吸产生乳酸.
【详解】
（1）在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度，原因是酶在最适温度条件下催化能力最强。
（2）通气阶段可促进酵母菌的有氧呼吸，为酵母菌的繁殖提供能量，从而增加酵母菌数量。
（3）① 据图分析，与颠倒前相比，B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是先快速增长后趋于稳定。A、B层颠倒后，B层醋酸杆菌获得的氧气较为充足，环境中的营养物质和pH也会影响醋酸杆菌的种群密度。
② 乳酸菌为厌氧菌，颠倒前的B层和颠倒后的A层醋醅有利于乳酸菌的繁殖。
③ 发酵后期营养物质消耗等环境因素的变化，加剧了不同种类乳酸菌的竞争，淘汰了部分乳酸菌种类，使成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少。
【点睛】
本题结合天津独流老醋生产工艺考查发酵过程中不同阶段的微生物代谢类型和条件控制。属于容易题。解题关键是明确酵母菌、乳酸菌和醋酸杆菌的代谢类型，准确分析A、B层颠倒后其发酵条件的不同。易错点是最后一空，错因在于未能注意题干中“不同种类乳酸菌”而考虑乳酸菌的种内斗争。
5. B.
【分析】
1、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。
2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。
（1）如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；
（2）如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。
3、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。
4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
【详解】
A、发酵工程与传统发酵技术都需要利用微生物来进行发酵，A错误；
B、由分析可知，发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身，B正确；
C、在发酵工程的发酵环节中，发酵条件不仅影响微生物的生长繁殖，也会通过影响酶的活性影响微生物的代谢途径，C错误；
D、单细胞蛋白是指利用发酵工程获得的大量的微生物菌体，D错误。
故选B。
6. A.
【分析】
发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等方面。发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。发酵工程在医药、食品、农业、冶金、环境保护等许多领域都得到广泛应用。
【详解】
A、单细胞蛋白是以淀粉或纤维素的水解液、制糖工业的废液等为原料，通过发酵获得的大量的微生物菌体，不是从微生物细胞中分离的物质，A错误；
B、一种生产乙型肝炎疫苗的方法就是将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌，再通过发酵生产，可以大大提高生成效率，B正确；
C、发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，通过发酵工程生产的苏云金杆菌可制成微生物农药，用来防治多种农林虫害，C正确；
D、发酵过程应避免杂菌污染，若培养基或发酵设备灭菌不彻底，则可能被杂菌污染，造成发酵产品被分解，产量降低，D正确。
故选A。
7. B.
【分析】
发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。
【详解】
A、培养基和发酵设备都必须经过严格灭菌，以防止杂菌污染导致产量大大下降；发酵过程中适时补充灭菌的培养液和空气，以满足发酵菌种的代谢需求，A正确；
B、环境条件既会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物代谢产物的形成，故发酵过程需要适宜的温度和pH，以保证酶的活性等，B错误；
C、发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，C正确；
D、发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，可通过萃取、提纯等方法获得产品，另一类是菌体本身，可通过过滤、沉淀等方法分离和干燥，得到产品，D正确。
故选B。
8. D.
【分析】
果酒制备的菌种是酵母菌，条件：温度18-25℃，先通气后密闭。通气阶段，酵母菌有氧呼吸获得能量大量繁殖，密闭阶段发酵产生酒精。pH最好是弱酸性。
【详解】
A、酵母菌进行有氧呼吸获得能量大量繁殖，无氧条件下，发酵产生酒精，故无氧条件下酵母菌能进行无氧呼吸存活但不能大量繁殖，A正确；
B、自然发酵制作葡萄酒时起主要作用的菌是葡萄皮上的野生型酵母菌，B正确；
C、葡萄皮中的色素进入发酵液使葡萄酒呈现颜色，C正确；
D、制作过程中随着发酵的进行发酵液中糖含量减少，D错误。
故选D。
9. D.
【分析】
1、原核生物与真核生物最主要的区别在于有无以核膜包被的细胞核。
2、原核生物的细胞壁的组成成分主要是肽聚糖，真菌细胞壁的组成成分主要是几丁质，真核生物细胞壁的组成成分主要是纤维素和果胶。
3、大豆富含蛋白质，水解后变成多肽或氨基酸。
【详解】
A、在青贮饲料中添加乳酸菌，通过乳酸菌的发酵，可以提高饲料品质，使饲料保鲜，同时提高动物免疫力，A正确；
B、用酵母菌等生产的单细胞蛋白可作为食品添加剂，甚至制成“人造肉”供人们直接食用，B正确；
C、酱油产品的生产，以大豆为主要原料，利用产生蛋白酶的霉菌进行发酵，霉菌产生的蛋白酶和肽酶将原料中的蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸，然后经淋洗、调制成的酱油产品，C正确；
D、发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程，不一定是无氧呼吸，D错误。
故选D。
10. ACD.
【分析】
果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是异养兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精。
【详解】
A、赤霉素能促进种子的萌发，据此可推测若用赤霉素处理大麦，可诱导α-淀粉酶相关基因的表达，促进α-淀粉酶的合成，进而使大麦种子无须发芽就能产生α-淀粉酶，A正确；
B、焙烤可以杀死大麦种子的胚，但不使淀粉酶失活，没有进行灭菌，B错误；
C、糖浆经蒸煮（产生风味组分、终止酶的进一步作用，并对糖浆灭菌）、冷却后再接种酵母菌进行发酵，防止高温杀死菌种，C正确；
D、转基因技术已被用来减少啤酒酵母双乙酰的生成，缩短啤酒的发酵周期，属于转基因技术在微生物领域的应用，D正确。
故选ACD。
11. ACD.
【分析】
参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型；参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型；参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，其新陈代谢类型是异养厌氧型。
【详解】
A、乳酸菌属于厌氧细菌，开盖放气会影响乳酸菌发酵，因此不能开盖放气，A错误；
B、制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，是为了发酵初期让酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，而制作泡菜的盐水要淹没全部菜料，以保证乳酸菌进行无氧呼吸，B正确；
C、醋酸菌为好氧细菌，且发酵温度高于果酒的发酵温度，因此制作好葡萄酒后，除通入无菌空气，还需要适当提高发酵装置的温度，C错误；
D、果酒发酵时温度宜控制在18～30 ℃，果醋发酵时温度宜控制在30～35 ℃，泡菜的制作温度低于30～35 ℃，D错误。
故ACD。
12. B.
【分析】
1、果酒制作的菌种是酵母菌，来源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌种保藏中心，条件是无氧、适宜温度是18～25℃，pH值呈酸性。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。最适温度为30～35℃。
【详解】
A、当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，同时乙醇还可以抑制杂菌繁殖，A正确；
B、酵母菌一般以出芽的方式繁殖，醋酸杆菌以二分裂的方式进行增殖，B错误；
C、酵母菌发酵过程中先通气使其大量繁殖，再密闭发酵产乙醇；醋酸杆菌为好氧菌，需持续通入无菌氧气，C正确；
D、酵母菌适宜温度是18～25℃，醋酸杆菌最适温度为30～35℃，D正确。
故选B。
13. B.
【分析】
毛霉，是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型，毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将大豆中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。乳酸菌在无氧条件下将葡萄糖分解成乳酸。
【详解】
A、毛霉产生的蛋白酶能催化分解大豆蛋白，将蛋白质分解为易消化的小分子肽和氨基酸，A正确
B、毛霉是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型，因此第一阶段在有氧条件下发酵，B错误；
C、加入一定量的食盐、生姜、蒜瓣和其他香辛料不仅能防腐杀菌还能调制风味，C正确；
D、第二阶段以蔬菜与发酵过的大豆为主，进行乳酸发酵，产生乳酸和亚硝酸盐，乳酸积累会导致发酵体系的pH降低，D正确。
故选B。
14. A.
【分析】
培养基的主要成分有水、无机盐、碳源与氮源，统计微生物的方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数法。
【详解】
A、据图可知，该生产过程中有酿酒酵母的参与，酵母菌呼吸作用会产生二氧化碳，故该生产过程中，一定有气体生成，A正确；
B、糖类是主要的能源物质，微生物生长所需的碳源主要来源于果糖生产废水，B错误；
C、分析图示可知，该技术中有连续搅拌反应器的过程，该操作的可以增加微生物与营养物质的接触面积，此外也可增大溶解氧含量，故据此推测该生产工艺利用微生物的有氧发酵技术生产蛋白质，C错误；
D、沼气生产利用的是厌氧微生物，在连续搅拌反应器中厌氧微生物会被抑制，因此沼气池废料无需灭菌，D错误。
故选A。
15. B.
【分析】
果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，酒精发酵时，一般将温度控制在18～25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。
【详解】
A、酵母菌无氧呼吸产酒精，黄酒中的酒精是酵母菌利用“黍米”经无氧呼吸产生的代谢产物，A正确；
B、利用酵母菌酿酒的过程中，水是酵母菌有氧呼吸的产物，而酒精是酵母菌无氧呼吸的产物，显然二者不是同时产生的，B错误；
C、“陶器必良”是为了有良好的容器从而控制好发酵过程气体条件，“火剂必得”是指控制适宜的温度保证酵母菌发酵所需，通常为18～25℃，C正确；
D、黄酒酿造过程中发酵液出现的气体是二氧化碳，二氧化碳不仅是酵母菌无氧呼吸的产物，而且也是酵母菌有氧呼吸的产物，因此不都是在酵母菌细胞质基质中经过无氧呼吸产生的，也有的是在线粒体中经过有氧呼吸第二阶段产生的，D正确。
故选B。
16. B.
【分析】
参与酒的制作的微生物主要是酵母菌，其新陈代谢的类型为异养兼性厌氧型，较适宜的发酵温度为18~30℃。有氧条件下，已母菌进行有氧呼吸大量繁殖，此时糖类被分解为二氧化碳和水，在无氧的环境中酵母菌把糖类分解为酒精和二氧化碳。
【详解】
A、糯米或粳米中所含物质淀粉、蛋白质等可为微生物提供碳源和氮源，A正确；
B、酵母菌发酵的“七日”中，前期主要是有氧呼吸，该过程产生水，后期才开始无氧呼吸产生酒精，因此水和酒精不是同时产生的，B错误；
C、“入甑蒸令汽上”充分利用了酒精易挥发的特点，C正确；
D、“酸坏”是醋酸菌将乙醇变为乙酸，醋酸菌是好氧菌若密封不严，醋酸菌将乙醇变为乙酸温度应为30~35℃，D正确。
故选B。
17. C.
【分析】
乳酸菌是发酵糖类主要产物为乳酸的一类细菌的总称，泡菜的制作离不开乳酸菌。
【详解】
A、泡菜制作过程中，所用的食盐水经煮沸后可除去水中的氧气并杀灭杂菌，A正确；
B、制作泡菜“咸而不酸”说明乳酸菌的呼吸产生的乳酸较少，可能原因是食盐浓度过高，发酵温度过低导致泡菜未能正常发酵，B正确；
C、从图中可以看出，亚硝酸盐含量上升最快的是食盐浓度为5%时，其峰值出现最早，当食盐浓度为7%时，亚硝酸盐含量上升相对较慢，C错误；
D、泡菜的制作原理是利用乳酸菌在无氧条件下进行乳酸发酵，所以取食泡菜时，时间不宜过长，防止空气进入对乳酸菌发酵产生抑制作用，D正确。
故选C。
18. C.
【分析】
1 、果酒制作的菌种是酵母菌，来源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌种保藏中心，条件是无氧、适宜温度是 18 ～ 25℃ ， pH 值呈酸性。
2 、在制作葡萄酒的过程中，葡萄汁装入瓶中时要留出大约1/3的空间，这样有利于酵母菌大量繁殖，并能防止发酵液溢出；酵母菌在无氧条件下进行无氧呼吸产生酒精和CO₂，使培养瓶内气体增多，所以每隔12 h左右将瓶盖拧松一次，此后再拧紧，目的是放出发酵产生的CO₂，同时尽量不让O₂进入瓶中。
【详解】
A、制造果酒利用的是酵母菌的无氧呼吸，因此浸出液过滤后应保存于密闭容器中，但不能将容器装满，要留1/3的空间，这样有利于酵母菌大量繁殖，并能防止发酵液溢出，A正确；
B、麦芽中含有淀粉酶，淀粉酶可以水解红薯中的淀粉得到葡萄糖，因此拌入麦芽利于酵母菌获得更多发酵底物，B正确；
C、酵母菌繁殖的最适温度是20℃，因此20℃保持24h有利于提高发酵液中酵母菌数量，温度上升至30℃有利于酵母菌发酵，C错误；
D、温度上升至30℃，有利于酵母菌发酵，此后每半天搅拌一次，搅拌有利于酵母菌与营养物质充分混合，D正确。
故选C。
19. B.
【分析】
酵母菌属于兼性厌氧，既能进行有氧呼吸又能进行无氧呼吸；醋酸菌属于好氧菌。
【详解】
发酵初期，酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，分解较多的葡萄糖，产生大量二氧化碳和水，二氧化碳溶于水，pH下降，随着氧气的消耗，到发酵中期，酵母菌进行无氧呼吸产生较少的二氧化碳和酒精，pH稍上升，后期接种醋酸菌，适当升高温度并通气，醋酸菌大量繁殖，利用葡萄糖或酒精生成醋酸，pH迅速下降。因此能表示整个发酵过程培养液pH变化的曲线是②，答案选B.
20. A.
【分析】
1、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型；果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸；
2、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌；在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
【详解】
A、为了防止发酵过程中发酵液溢出，葡萄汁装入发酵瓶时不能装满，要留约1/3的空间，A错误；
B、夏天开瓶后的红酒，在有氧的条件下，空气中的醋酸菌将乙醇变成乙醛而后变为乙酸，导致红酒变酸，B正确；
C、巴氏消毒法是一种低温消毒法，用巴氏消毒法对牛奶消毒既能杀死牛奶中的绝大多数微生物，又不破坏牛奶中的营养成分，C正确；
D、泡菜汁中含有一定量的发酵菌种，所以在腌制过程中，加入一些已经腌制过泡菜汁可缩短腌制时间，D正确。
故选A。
21. AC.
【分析】
腐乳的制作原理：参与豆腐发酵的微生物有酵母、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉，其代谢类型为异养需氧型，适宜温度为15℃～18℃；毛霉能够产生蛋白酶，将蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸。
【详解】
A、腐乳发酵时，酵母、曲霉和毛霉等多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是毛霉，A正确；
B、生产腐乳起主要作用的微生物是毛霉，为真核生物，其有氧呼吸的场所为细胞质基质和线粒体，B错误；
C、毛霉能够产生蛋白酶，将蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸，味道鲜美，易于消化吸收，C正确；
D、抗生素不能滥用，大规模生产中不能加抗生素，D错误。
故选AC。
22. C.
【分析】
1、利用青贮原料上存在的乳酸菌等微生物，通过厌氧呼吸将青贮原料中的碳水化合物转化成有机酸，使pH值降到3.8~4.2，抑制有害菌的生长，从而实现长期保存饲料及其营养物质的目的。同时，微生物的活动使青贮饲料带有芳香酸甜的味道，提高了家畜的适口性。
2、微生物农药是非人工合成的、具有杀虫杀菌或抗病能力的生物活性物质的微生物制剂。微生物农药最大的优势在于能克服化学农药对生态环境的污染和减少在农副产品中的农药残留量，同时它的大面积应用可促进农副产品的品质和价格大幅上升，推动农村经济增长和农民增收。
【详解】
A、食品添加剂过量使用会对人体健康造成影响，甚至危及生命，不能过量使用，A错误；
B、利用放线菌通过发酵工程产生的井冈霉素可以用来防治水稻枯纹病，这种治理不会对环境造成影响，属于生物防治，B错误；
C、在青贮饲料中添加乳酸菌，通过乳酸菌的发酵，可以提高饲料品质，使饲料保鲜，同时提高动物免疫力，C正确；
D、单细胞蛋白即微生物菌体，不需要从微生物细胞中提取，D错误。
故选C。
23. ACD.
【分析】
啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，其工业化生产流程如下：①大麦种子发芽，释放淀粉酶；②加热杀死种子胚但不使淀粉酶失活；③将干燥的麦芽碾磨成麦芽粉；④淀粉分解，形成糖浆；⑤糖浆加入啤酒花，蒸煮；⑥加入酵母菌，发酵；⑦过滤，77℃保温30分钟；⑧过滤、分装啤酒进行出售。
【详解】
A、焙烤阶段需要保证淀粉酶的活性，A错误；
B、发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期酵母菌呼吸作用减弱，可以适当延长排气时间间隔，B正确；
C、酵母菌大量繁殖及大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段进行，C错误；
D、用赤霉素溶液浸泡大麦种子可以有效促进α-淀粉酶合成，增加麦芽汁中可发酵糖的含量，D错误。
故选ACD。
24. (1)     18~30     有利于酵母菌的繁殖     C₆H₁₂O₆→酶→2 C₂H₅OH+2CO₂+能量
(2)     酸性重铬酸钾     灰绿色
(3)     C₂H₅OH+O₂→酶→CH₃COOH+H₂O+能量     升高温度至30—35℃、打开软管夹通气
(4)及时排出气体、防止外界杂菌的污染、通过气泡的生成了解发酵状况、排气不需要人工控制等
.
【分析】
参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】
（1）利用酵母菌制作果酒时，温度一般控制在18~30℃。发酵初期一般先通气后紧闭软管夹，通气的目的是酵母菌有氧呼吸，有利于酵母菌的繁殖。酵母菌有氧呼吸
反应方程式为C₆H₁₂O₆

2 C₂H₅OH+2CO₂+能量。
（2）酒精可用酸性重铬酸钾溶液鉴定，溶液的颜色由橙色变成灰绿色。
（3）在制作好的葡萄酒的基础上发酵制作葡萄醋，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，用化学反应式表示其原理是C₂H₅OH+O₂

CH₃COOH+H₂O+能量，醋酸菌为好氧型细菌，发酵温度为30-35℃，发酵条件需要做出的具体调整是升高温度、打开软管夹通气。
（4）图中排气构件由回旋式单向阀通过硅胶塞连接于排气口而成，使用前先在单向阀内装入约1/3体积冷却的开水，这样处理的主要好处有及时排出气体、防止外界杂菌的污染、通过气泡的生成了解发酵状况、排气不需要人工控制等。
25.      碳源（能量）     不能     葡萄糖溶液的浓度过高会引起谷氨酸棒状杆菌失水，从而影响发酵过程     高压蒸汽灭菌     利于菌体与培养液充分接触，便于谷氨酸棒状杆菌获得营养物质和排出代谢废物     通入无菌空气和加入缓冲液维持适宜的pH     （负）反馈     既能满足微生物对物质的需求，也避免物质的浪费，使生物体内的物质维持在一定的浓度.
【分析】
培养基的概念及营养构成
（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。
（2）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
【详解】
（1）葡萄糖作为生命的燃料，可为谷氨酸棒状杆菌的生长提供碳源（能量），葡萄糖溶液的浓度过高会引起谷氨酸棒状杆菌失水，从而影响发酵过程，因此培养基中的葡萄糖溶液的浓度不能由15%左右提升到25%。培养基通常采用高压蒸汽灭菌法灭菌。由于液体培养基有利于菌体与培养液的充分接触，便于谷氨酸棒状杆菌获得营养物质和排出代谢废物，因此生产谷氨酸的过程中通常选用液体培养基。
（2）根据题目信息可知，溶氧不足以及pH呈酸性时，不利于谷氨酸的产生，因此可通过通入无菌空气和加入缓冲液来为谷氨酸的产生提供适宜的条件。
（3）谷氨酸脱氢酶能促进谷氨酸的生成，在谷氨酸的浓度超过一定程度时，会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，从而使谷氨酸维持在一定的含量，既满足微生物对物质的需求，也避免物质的浪费，这种调节方式是通过调节酶活性而实现的负反馈调节机制。
【点睛】
熟知发酵工程的概念以及生产谷氨酸的实例中的操作要点是解答本题的关键，能根据题目信息进行合理的分析从而作答时解答本题的另一关键。
26. B.
【分析】
培养基的组成成分包括碳源、氮源，水、无机盐，有的还有生长因子，以CO2为唯一碳源的培养基培养自养微生物，培养基中还必须提供氮源、水、无机盐。
【详解】
A、氮源物质为该微生物提供必要的氮素，A正确；
B、该碳源是二氧化碳，属于无机物，不能作为微生物的能源物质，B错误；
C、无机盐是该微生物不可缺少的营养物质，C正确；
D、琼脂的作用是在固体及半固体培养基中充当凝固剂，D正确。
故选B。
27. C.
【分析】
1.无菌技术的主要内容：
①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
2.常用的灭菌方法主要有灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌和干热灭菌等。
①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；
②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；
③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30 min。
【详解】
①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢，而灭菌能杀灭环境中一切微生物，包括孢子和芽孢，①错误；
②无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒，②正确；
③指示剂和染料可能混有微生物，因此加入培养基中的指示剂和染料也需要灭菌，③错误；
④涂布平板时所用的涂布器需酒精浸泡后灼烧灭菌，④正确；
⑤培养基要进行高压蒸汽灭菌，⑤正确；
⑥家庭制作葡萄酒时，要将容器进行灭菌，但是葡萄不能灭菌，因为发酵用的酵母菌来自于葡萄，⑥错误。
故选C。
28. A.
【分析】
分析图形：①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养。
【详解】
A、①步骤表示倒平板，冷却后将其倒过来放置，A错误；
B、①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，B正确；
C、接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，防止造成污染，C正确；
D、用接种环在平板上划线时注意不能将培养基划破，D正确。
故选A。
29.      蛋白胨     不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同      能够     硝化细菌可以利用空气中的CO₂作为碳源     倒置     在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征     灭菌.
【分析】
1、微生物培养基的营养构成：①各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐；②不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
2、配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项：①倒平板的温度一般50℃左右适宜，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固；②平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
【详解】
（1）葡萄糖只能为细菌提供碳源，硝酸钠为细菌提供无机盐，而蛋白胨既可以为细菌碳源，也可以为细菌提供氮源；由于不同的细菌生长繁殖的最适宜pH是不同的，因此制备培养基时要根据所培养的细菌的不同来调节培养基的pH；硝化细菌属于化能自养型微生物，其可以利用氨氧化释放的能量将空气中的二氧化碳固定为有机物，因此硝化细菌可以在无碳培养基中生长。
（2）用平板培养细菌时，一般需要将平板倒置培养，以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
（3）由于每一大类微生物都有其独特的细胞形态，因而其菌落形态特征也各异，因此根据菌落的形态、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物。
（4）有些使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境。
【点睛】
解答本题的关键是识记微生物培养基的成分、培育条件、培养过程以及注意事项，能够根据不同微生物的代谢类型判断其所需营养成分的种类，进而结合题干要求分析答题。
30. D.
【分析】
从土壤中筛选目的微生物的流程一般为：土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。通常选取菌落数在30-300的平板进行统计。
【详解】
A、土壤中各种微生物数量不同，细菌大约为70%～90%，其次是放线菌，真菌最少，故不同类型微生物，要按不同稀释倍数进行，A正确；
B、测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，需要选用的稀释范围不同，B正确；
C、一般来说，可根据菌落的形状、大小、颜色等特征区分不同的微生物，C正确；
D、验证选择培养基是否具有选择作用，需设立牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，若后者上的菌落数明显大于前者，说明前者具有筛选作用，D错误。
故选D。
31. C.
【分析】
选择培养基是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类的微生物生长的培养基。据此根据筛选的目的，在培养基中添加或去除特定物质，便可得到所需菌种。
【详解】
根据题目要求，筛选出不需要亮氨酸的菌株，即在没有亮氨酸的培养基上能够生长，应使用的培养基为L-、S可加可不加；筛选出抗链霉素的菌株应使用的培养基为S+、L可加可不加，筛选出不需要亮氨酸、抗链霉素的菌株应用的培养基L-、S+，ABD错误，C正确。
故选C。
32.      高压蒸汽灭菌     琼脂     选择     10⁴     S的浓度超过某一值时会抑制菌株的生长     取淤泥加入无菌水，涂布（或稀释涂布）到乙培养基上，培养后计数     水、碳源、氮源和无机盐.
【分析】
培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐等。
常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。
常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。
【详解】
（1）常用高压蒸汽灭菌法处理盛有水或培养基的摇瓶，乙为固体培养基，故需要加入Y琼脂；甲和乙培养基可以用于筛选能降解S的菌株，故均属于选择培养基。
（2）若要在每个平板上涂布100μL稀释液后的菌液，且每个平板上长出的菌落数不超过200个，则摇瓶M中的菌液稀释的倍数至少为2×10⁷÷1000×100÷200=1×10⁴倍。
（3）当培养基中的S超过某一浓度后，可能会抑制菌株的生长，从而造成其对S的降解量下降。
（4）要测定淤泥中能降解S的细菌的细胞数，可以取淤泥加无菌水制成菌悬液，稀释涂布到乙培养基上，培养后进行计数。
（5）甲和乙培养基均含有水、无机盐、碳源、氮源。
【点睛】
培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，接种工具应该进行灼烧灭菌，玻璃器皿等耐高温的、需要干燥的物品，常采用干热灭菌。
33. B.
【分析】
选择培养基：根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。
鉴别培养基：依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计。
【详解】
A、根据题干信息“甲菌菌落周围呈现深蓝色”，说明甲可以分泌脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸，脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色，因此甲菌属于解脂菌，A正确；
B、乙菌落周围没有出现深蓝色，说明乙菌落不能产生脂肪酶，不能利用脂肪为其供能，但乙菌落也可以在培养基上生存，说明该培养基不是以脂肪为唯一碳源，B错误；
C、可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比，更加直观，C正确；
D、可以利用该平板来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力，观察指标可以是菌落周围深蓝色圈的大小，D正确。
故选B。
34. C.
【分析】
实验室常用的消毒和灭菌方法的比较：
1、消毒：煮沸消毒法（一般物品）、巴氏消毒法（一些不耐高温的液体，如牛奶）、化学药剂消毒法（如用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源等）、紫外线消毒法（接种室、操作台）；
2、灭菌：灼烧灭菌（接种工具）、干热灭菌（玻璃器皿、金属用具）、高压蒸汽灭菌（培养基及容器）。
【详解】
A、为避免杂菌污染干扰，需对配制的培养基进行高压蒸汽灭菌，A正确；
B、葡萄球菌需从人体皮肤的微生物中分离，为避免杂菌污染，故需要使用无菌棉拭子从皮肤表面取样，B正确；
C、用取样后的棉拭子浸出液在固体培养基上涂布，C错误；
D、根据微生物在固体平板培养基表面形成的菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等特征进行鉴别，D正确。
故选C。
35. B.
【分析】
分析平板结果可知，采用的接种方法为平板划线法，且划线顺序是Ⅰ区、Ⅱ区、Ⅲ区，可以看到Ⅲ区中出现了单菌落。
【详解】
A、倒平板后无需晃动，A错误；
B、Ⅰ区、Ⅱ区没有出现单菌落，说明细菌数量太多，故应从Ⅲ区挑取单菌落，B正确；
C、出现单菌落即达到了菌种纯化的目的，C错误；
D、刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解
后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，D错误。
故选B。
36. (1)     石油     DNA、RNA、蛋白质
(2)N₀•2ⁿ
(3)在无菌条件下，将等量等浓度的A菌液和B菌液分别接种到平板Ⅰ的甲和乙两孔处，平板Ⅱ也进行同样的操作，在相同且适宜条件下培养一段时间，比较两个平板的两孔处的透明圈大小并作记录，根据透明圈大降解能力强，透明圈小降解能力弱，进而比较A、B降解石油的能力
(4)     A     A菌株降解石油的能力高于B菌株，并且在没有添加氮源的培养基中也能生长.
【分析】
培养基对微生物具有选择作用。配置培养基时根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求, 加入某些物质或除去某些营养物质，抑制其他微生物的生长，也可以根据某些微生物对一些物理、化学因素的抗性，在培养基中加入某种化学物质,从而筛选出待定的微生物。这种培养基叫做选择培养基。
【详解】
（1）培养基的成分有碳源、氮源、无机盐和水等，从组成培养基的物质所含化学元素可知，作为碳源的成分是石油。生物大分子DNA、RNA、蛋白质都含有N元素，故氮源在菌体内可以参与合成这些物质。
（2）由题意“资源和空间不受限制”可知，细菌的种群数量呈J型曲线增长，由于细菌进行二分裂，细菌每繁殖一代就是上一代的2倍，根据公式N_t=N₀•λ^t，λ=2，繁殖n代后细菌的数量是N₀•2ⁿ。
（3）分析表格数据可知，实验的结果是：在平板Ⅰ上，A菌株降解石油的能力高于B菌株；在平板Ⅱ上，A菌株仍然能降解石油，而B菌株不能降解，根据实验的单一变量和对照原则，推测该同学的思路是：在无菌条件下，将等量等浓度的A菌液和B菌液分别接种到平板Ⅰ的甲和乙两孔处，平板Ⅱ也进行同样的操作，在相同且适宜条件下培养一段时间，比较两个平板的两孔处的透明圈大小并作记录，根据透明圈大降解能力强，透明圈小降解能力弱，进而比较A、B降解石油的能力。
（4）由表格数据可知，在平板Ⅱ（无氮源的培养基）上，A菌株仍然能降解石油，而B菌株不能降解，所以要治理贫氮且被石油污染的土壤，应该选用A菌株，因为A菌株降解石油的能力高于B菌株，并且在没有添加氮源的培养基中也能生长。

37. B.
【分析】
培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因为它们来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。另外，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
【详解】
A、培养基中的营养物质浓度过高会导致微生物出现失水过多，甚至出现死亡的现象，对生长不利，A错误；
B、培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，水也是培养基的营养构成成分，B正确；
C、微生物的纯培养物是不含杂菌的微生物，而不是不含有代谢废物，C错误；
D、微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤，D错误。
故选B。
38. D.
【分析】
1、泡菜制作的实验原理：（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。
2、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂

6CO₂+12H₂O+能量；（2）在无氧条件下，反应式如下：C₆H₁₂O₆

2CO₂+2C₂H₅OH+能量。
3、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
4、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型.腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
【详解】
A、制作果酒时，先将葡萄冲洗后，再除去枝梗，防止污染，A正确；
B、泡菜盐水入坛前应煮沸冷却，避免高温杀死菌种（乳酸菌），坛盖边沿的水槽中注满水，以制造无氧环境，B正确；
C、在腐乳的制作中，加盐腌制的目的是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，并可以抑制杂菌的生长，C正确；
D、制作酸奶时应保证无氧环境进行乳酸发酵，以提高酸奶的酸度，D错误。
故选D。
39. C.
【分析】
微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】
A、对于微生物进行分离的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，故采用平板划线法和稀释涂布平板法均可分离酵母菌，A正确；
B、可用湿热灭菌法（通常是高压蒸汽灭菌法）对培养酵母菌的马铃薯琼脂培养基进行灭菌，B正确；
C、通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，该过程中只蘸取一次菌液，C错误；
D、完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板（和一个未接种的平板）倒置培养，放恒温培养箱中培养，D正确。
故选C。
40. C.
【分析】
微生物纯化的原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
【详解】
A、涂布接种时，将涂布器末端浸在盛有酒精的烧杯中，取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有酒精的涂布器在内焰上引燃，A错误；
B、纯化培养时，不能用摇床培养，B错误；
C、可以用稀释涂布平板法对微生物进行分离计数，C正确；
D、观察菌落时，不能拿掉培养皿，容易杂菌污染，D错误。
故选C。
41. B.
【分析】
图中使用相同浓度抗生素Ⅰ～Ⅳ的四个大小相同的纸片，可以通过抑菌圈的大小来判定抗生素的抑菌效果，其中抑菌效果最好的是抗生素IV。
【详解】
A、培养基中的琼脂是凝固剂，不能为测试菌提供碳源，A错误；
B、由题干信息可知，图中是相同浓度（不同）抗生素Ⅰ～Ⅳ的四个大小相同的纸片，抑菌圈越大，抗生素的抑菌效果越好。故可以通过抑菌圈的大小来判定抗生素的抑菌效果，B正确；
C、在抑菌圈中出现的菌落均是对该种抗生素具有抗性的菌株，但无法通过题图信息来判断它们之间抗性的强弱，若要判断它们之间抗性的强弱还需进一步实验才能确定，C错误；
D、抗生素对病原菌具有选择作用，变异具有不定向性，抗生素不能诱导病原菌产生耐药性基因突变，D错误。
故选B。
42. B.
【分析】
1、由图可知，①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养。
2、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板五个步骤。
【详解】
A、①步骤表示倒平板，倒平板的培养基需要先调节pH后灭菌，A错误；
B、①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，B正确；
C、接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤④中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，完成步骤④共需灼烧接种环6次，C错误；
D、步骤④操作结束后需在培养皿的底上做好标记并倒置后放入培养箱中进行培养，D错误。
故选B。
43. D.
【分析】
细菌分解在尿素的过程中合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，PH升高，所以可以用检测pH的变化的方法来判断尿素是否被分解，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，PH升高，指示剂变红。
【详解】
A、牛的瘤胃中采集样本之后，若要扩大培养，扩大培养的培养基中不能加琼脂，即需要采用液体培养基，因为在液体培养基中营养物质的利用效率更高，A正确；
B、实验目的是筛选分解尿素的微生物，应该以尿素作为唯一氮源，该过程配制的培养基从用途看属于选择培养基，B正确；
C、对尿素溶液进行灭菌不能用高压蒸汽灭菌，否则会导致尿素分解，C正确；
D、根据实验结果可计算出每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为（49+47+45）÷3÷0.1×1000×1000=4.7×10⁸个，D错误。
故选D。
44. C.
【分析】
1、选择培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氨源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。
2、微生物常见的接种的方法（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】
A、根据实验结果可知，图中采用的接种方法为稀释涂布平板法，A错误；
B、图中①和②的菌落的特征可知，①稀释度为10^-6的菌落数明显多于②稀释度为10^-7时的菌落数，很可能是由于杂菌污染导致结果的出现，而不是分离出以尿素为氮源的微生物，B错误；
C、③④已经分离出单个细菌繁殖而来的尿素分解菌的菌落，尿素分解菌含有脲酶，能够催化尿素分解成氨、二氧化碳和水，C正确；
D、根据实验结果，无法判断自然界中能合成脲酶的微生物比例较高，D错误。
故选C。
45. CD.
【分析】
筛选分离目的微生物的一般步骤是：样品取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株，筛选分离生产PHA的菌种需要用稀释涂布平板法或平板划线法接种分离。其中稀释涂布平板法可用于微生物计数。
【详解】
A、步骤④为扩大培养，培养后⑤为检测菌体数目，说明步骤④中扩大培养采取的接种方法为稀释涂布平板法，平板划线法不能用于计数，A错误；
B、咸水湖中盐度较高，欲从某咸水湖中寻找生产PHA菌种，则步骤②可用稀释涂布平板法接种到含盐量较高的选择培养基上，以筛选耐盐的菌体，B错误；
C、步骤⑤检测菌体的数目和PHA的产量，该数据可用于进一步计算单一菌体产生PHA的效率，C正确；
D、步骤③培养后可形成菌落，故培养基为固体培养基，由于②中的选择培养基是筛选的耐盐的菌体，所以③中长出的单菌落不一定能合成PHA，D正确。
故选CD。
46. ACD.
【分析】
1、碳源的类型包括无机碳源和无机碳源。前者有包括CO₂、NaHCO₃等；后者包括糖类、脂肪酸、花生饼粉、石油等。
2、碳源的作用：①构成生物体细胞的物质和一些代谢产物；②既是碳源又是能源（有机碳源）。
【详解】
A、土壤样品中包含目的菌株，进行灭菌会杀死所有微生物包括要培养的目的菌株，所以不可以进行灭菌处理，A错误；
B、要筛选可以产生脂肪酶的细菌，步骤②的固体平板应是以脂肪作为唯一碳源的培养基，B正确；
C、细菌是原核生物，没有成形的细胞核和染色体，因此用射线照射不会引起细菌染色体变异，C错误；
D、透明圈大的菌落，酶活性不一定大，因此对初筛选的透明圈大的菌落要进行发酵培养，进一步对发酵液进行酶活性检测，D错误。
故选ACD。
47. ACD.
【分析】
题图分析：图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用“影印法”将菌种接种到两种培养基中，分别是基本培养基、完全培养基；在基本培养基中，某氨基酸突变株不能生长，而在完全培养基中能够生长，据此可以选择出氨基酸突变株。
【详解】
A、完全培养基上无法合成氨基酸的也可以生长，野生型的能在基本培养基培养，①②④为完全培养基，③为基本培养基，A错误；
B、紫外线可以提高突变的频率，A操作的目的是提高突变菌株的浓渡，扩大培养，B正确；
C、B操作是将菌液滴加到培养基表面，再用涂布器将菌液均匀的涂布在②表面，以便获得单菌落，C错误；
D、从图中可看出，D在基本培养基中无法生长，在完全培养基中可生长，说明D是氨基酸缺陷型菌落，故经C过程影印及培养后，可从④培养基中挑取D菌落进行纯化培养，D错误。
故选ACD。
48. AD.
每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。
【详解】
A、在含有尿素为唯一氮源的选择性培养基上，只有能够分解尿素的微生物才能生长繁殖，故纯化培养阶段使用选择培养基，应以尿素为唯一氮源，A正确；
B、振荡的目的是提高培养液的溶解氧的含量，使菌体充分接触培养液，提高营养物质的利用率，B错误；
C、稀释倍数越高，平板上出现的菌落数越少，所以中间试管涂布的3个平板的菌落平均数应大于160，C错误；
D、图示平板中平均有160个菌落，该过程中稀释的倍数为10⁴，最后只取了0.1mL进行涂布稀释，因此由图示菌落计数结果可知10克土样中的菌株数约为160×10⁵÷0.1×10=1.6×10⁸个，D正确。
故选AD。
49. (1)高压蒸汽灭菌、干热灭菌
(2)     葡萄糖     制糖废液     氮源、无机盐、水
(3)缺少淀粉酶
(4)分别配制一系列不同浓度梯度的以制糖废液为唯一碳源的培养基，培养菌株C，其他条件相同且适宜，一段时间后，测定并比较不同浓度制糖废液中的S的产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度即为生产S的最适碳源浓度

(5)减少污染、节省原料、降低生产成本.
【分析】
1、实验室常用的灭菌方法：（1）灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌；（2）干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；（3）高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30 min。
2、培养基的营养构成：各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐；不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
【详解】
（1）通常在实验室培养微生物时，为防止实验用的玻璃器皿等物品中原有的微生物污染培养物，需要使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子，即对所需的玻璃器皿进行灭菌，玻璃器皿常用的灭菌的方法有干热灭菌、高压蒸汽灭菌等。
（2）由实验结果可知，与以制糖废液为碳源相比，以葡萄糖为碳源时菌株C的细胞干重最大，说明最适于菌株C生长的碳源是葡萄糖；而以制糖废液为碳源时，用菌株C生产S的产量高于以葡萄糖为碳源时的产量，说明最适于生产S的碳源是制糖废液。微生物的生长一般都需要水、碳源、氮源和无机盐，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求，故菌株C的生长除需要碳源外，还需要氮源、无机盐、水等营养物质。
（3）分析题图表格可以看出在以淀粉为碳源的培养基中，菌株C不能生长，原因可能是菌株C不能合成淀粉酶或菌株C不能分泌淀粉酶，因而不能利用淀粉。
（4）要测定生产S的最适制糖废液为碳源的浓度，实验自变量为制糖废液的浓度，可分别配制一系列不同浓度梯度的以制糖废液为唯一碳源的培养基，培养菌株C，其他条件相同且适宜，一段时间后，测定并比较不同浓度制糖废液中的S的产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度，即为生产S的最适碳源浓度。
（5）利用制糖废液生产S可以实验废物利用，既有利于减少污染、节省原料，又能降低生产成本。

50. (1)     稀释涂布平板法     B
(2)     6.4×10⁷     小     当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
(3)防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染
(4)     B     5
(5)     乳酸菌     防止温度过高而将菌种杀死     乳酸菌是厌氧型细菌，在无氧条件下才能进行发酵
(6)改善肠道环境，维持肠道微生物的相对平衡
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【分析】
1、配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项：①倒平板的温度一般50℃左右适宜，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固；②平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
2、平板划线操作的注意事项：①第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌；②灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种；③划线时最后一区域不要与第一区域相连；④划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。
【详解】
（1）图1有梯度稀释操作，及0.1mL的涂布操作，是稀释涂布平板法。A是接种环、B是涂布器、C是滴管、D是接种针。要用B。
（2）分析图解可知，酸奶稀释了10⁵倍，在恒温培养箱中培养一段时间后，3个平板上菌落数分别为65个、63个、64个，则可以推测酸奶中每毫升含菌数为=（65+63+64）÷3÷0.1×10⁵=6.4×10⁷个。由于有的菌落可能是由2个或多个菌体形成的，因此运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小。
（3）培养时，一般将接种后的培养皿倒置培养，以防止皿盖上的水滴流入培养基造成污染。
（4）平板划线法时，每次从上次划线的末端开始划线，B符合题意。第一次划线之前需要灼烧，每次划线之后需要灼烧，则共需要5次。
（5）已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，待牛奶冷却后才能倒入酸奶的原因是防止温度过高而将菌种杀死。乳酸菌是厌氧型细菌，在无氧条件下才能进行发酵，需要拧紧瓶盖。
（6）酸奶可以抑制有害菌在肠道中生长繁殖，控制有害菌的数量，从而改善肠道环境，维持肠道微生物的相对平衡。
【点睛】
本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生识记配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程和相关注意点，掌握稀释涂布平板法的操作步骤并能够对异常实验结果进行原因分析。